produits chimiques02

L'utilisation du microscope optique en mycologie et lichénologie Les produits chimiques utiles en microscopie Jean-Pierre GAVERIAUX
Les produits chimiques indispensables à la microscopie peuvent être obtenus une fois par an lors de la session de microscopie qui se déroule chaque année, en février, au laboratoire de Fontainebleau. 01. Les milieux d'observation 02. Les milieux de réhydratation et de ramollissement 03. Les milieux de dissociation 04. Les fixateurs et milieux d'inclusion 05. Les deux colorants indispensables 06. Les colorants occasionnels 07. Les réactifs de Lugol et Melzer 08. Quelques colorants - réactifs spécifiques 09. La coloration vitale 10. Les milieux de conservation (milieu de montage permanent) 11. L’huile à immersion
2. Les milieux de réhydratation et de ramollissement
	Utilisés également comme milieu d'observation, les produits de réhydratation, souvent qualifiés de "regonflants", redonnent aux cellules prélevées sur des exsiccata des dimensions proches de celles qu'elles possédaient sur le frais. Plusieurs produits sont utilisables : a) L'ammoniaque (NH4OH) est une solution de gaz (ammoniac) dans l'eau. Sa concentration atteint environ 25% dans la solution du commerce. On préfère toutefois la solution diluée à 2-3% ; son action est regonflante mais également légèrement dissociante. Il y a destruction de certains pigments mais d'autres sont nettement renforcés et certaines ornementations sporales bien mises en évidence. Ce produit regonflant sert de solvant pour le Rouge Congo (Congo ammoniacal). b) La potasse (KOH) ou hydroxyde de potassium à 5-10% a une action regonflante assez forte. Elle est surtout utilisée pour des tissus coriaces qui ont besoin d'une réhydratation et d'une dissociation énergique (voir paragraphe suivant). c) L'hydrate de chloral et le lactophénol (voir paragraphe précédent). Remarque : Ces regonflants suffisent généralement pour étudier la plupart des caractéristiques cellulaires ; toutefois, si on désire rechercher la disposition relative des diverses cellules, il faut faire des coupes et le matériel d'herbier, cassant, doit être préalablement ramolli. Deux milieux peuvent être utilisés pour modifier la consistance des spécimens secs : Le ramollisseur de Dean Eau bidistillée ........................................................... 89 mL détergent vaisselle concentré ....................................... 1 mL glycérine .................................................................. 10 mL Le ramollisseur de Clémençon ammoniaque concentrée ........................................... 20 mL Ethanol à 96° ........................................................... 80 mL glycérine ........................................................................ 1 g Au bout de quelques minutes (à parfois plusieurs heures), les coupes sont possibles. Il faut ensuite, avant coloration, éliminer la glycérine par lavage à l'eau (mettre de l'eau et éponger plusieurs fois avec un papier filtre). Les fragments peuvent également être réhydratés avec les regonflants précédemment cités puis colorés.