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Objectif Nikon x100 (dry)

Objectif Olympus x100 (dry)

Certains objectifs x100

s'utilisent sans huile

(objectifs à sec = dry)

Leur ouverture numérique ne peut

toutefois pas dépasser la valeur 1

 Une bague permet l'ajustement

en fonction de l'épaisseur

de la lamelle couvre-objet

qui n'est pas toujours égale

à 17 µm mais varie en plus ou

en moins autour de cette valeur.

L'observation au x1000 et l'immersion

L’immersion est une technique de microscopie optique permettant d’augmenter le pouvoir résolvant des objectifs en plaçant entre la lentille frontale de l’objectif à immersion et la lamelle couvre-objet, une goutte d’huile (huile à immersion) dont l’indice de réfraction (n = 1,518) est proche de celui du verre (n = 1,515).

- Autrefois on utilisait la résine de cèdre ou huile de cèdre (n = 1,52) mais lorsque celle-ci n’était pas essuyée correctement en fin de séance, elle durcissait et lors du nettoyage, il y avait risque de détérioration de l’objectif à immersion qui est très onéreux.

- Actuellement on utilise des huiles de synthèse non résinifiables, à indice de réfraction n = 1,518. Ces huiles ne durcissent pas et il n’est pas nécessaire de nettoyer avec minutie l’objectif après chaque utilisation du microscope ; il suffit d’essuyer l’objectif avec un papier optique. Ces huiles de synthèse sont disponibles en différentes viscosités ; pour les utilisations de platines microscopiques en position verticale elles sont très visqueuses, pour les utilisations en ambiance froide, elles sont très fluides. En mycologie et en lichénologie on utilise uniquement l’huile de viscosité normale

Actuellement, les huiles à immersion répondent à certaines normes de fabrication, elles sont dépourvues de biphényls polychlorés toxiques représentant un réel danger pour l'utilisateur qui peut en absorber par la peau lorsqu'il essuie les lamelles et les objectifs du microscope.

Schéma du dispositif d'observation en immersion homogène avec un objectif planapochromatique de grande ouverture numérique (n= 1,40) : l'huile est nécessaire sur la lamelle mais également entre la lame et le condenseur ; les rayons lumineux ne passent pas dans l'air (n= 1), ils se propagent dans un milieu ayant pratiquement toujours le même indice de réfraction que le verre. Dans la grande majorité des cas, l'huile est simplement placée entre la lamelle et l'objectif.

(1) objectif achromatique x100 à immersion d'ouverture numérique égale à 1,25 réglable (avec le diaphragme)

(2) objectif apochromatique x100 à immersion d'ouverture numérique égale à 1,40

(1) objectif apochromatique x60 à immersion d'ouverture numérique égale à 1,40